Preview

Вестник Российской академии медицинских наук

Расширенный поиск

РАЗРАБОТКА МЕТОДА ОЦЕНКИ ОБЩЕЙ АКТИВНОСТИ КОМПЛЕМЕНТА НА ОСНОВЕ КОМПЛЕМЕНТЗАВИСИМОГО ИММУННОГО ЛИЗИСА ЛИПОСОМ

https://doi.org/10.15690/vramn.v69.i3-4.991

Полный текст:

Аннотация

Цель исследования: создать быстрый и воспроизводимый способ определения общей активности комплемента (total complement activity, ТСА) в сыворотке крови человека и животных. Материалы и методы: получены устойчивые при хранении препараты липосом, поверхность которых сенсибилизирована 2,4-ДНФ гаптенами, а внутренний объем заполнен кальцеином или сульфородамином 101. Исследованы закономерности иммунного комплементзависимого лизиса липосом в присутствии анти-2,4-ДНФ иммуноглобулинов и препаратов комплемента животных. Результаты: показано, что степень иммунного лизиса зависит от концентрации комплемента, что может быть использовано для определения уровня ТСА. Исследование сывороток крови пациентов продемонстрировало корреляцию данных (r =0,793), полученных с помощью липосомной иммунолитической системы, и нефелометрического анализа с применением суспензии эритроцитов. Выводы: метод позволяет определять активность комплемента в сыворотках крови в широком диапазоне за временной интервал 15 мин без разделения компонентов реакции, что может быть полезно для определения уровня ТСА у пациентов с различными заболеваниями и при проведении научных исследований. 

Об авторах

С. Н. Скопинская
ГосНИИ биологического приборостроения, Москва, Российская Федерация
Россия

кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник отдела спектральных методов анализа ГосНИИ биологического приборостроения
Адрес: 125424, Москва, Волоколамское ш., д. 75, тел.: (495) 491-86-83



С. П. Ярков
ГосНИИ биологического приборостроения, Москва, Российская Федерация
Россия

доктор биологических наук, начальник отдела спектральных методов анализа ГосНИИ биологического приборостроения
Адрес: 125424, Москва, Волоколамское ш., д. 75, тел.: (495) 491-86-83



Е. Н. Храмов
ГосНИИ биологического приборостроения, Москва, Российская Федерация
Россия
доктор технических наук, профессор, директор ГосНИИ биологического приборостроения
Адрес: 125424, Москва, Волоколамское ш., д. 75, тел.: (495) 491-73-72


А. В. Анташев
ФНЦ трансплантологии и искусственных органов им. акад. В.И. Шумакова, Москва, Российская Федерация
Россия

кандидат медицинских наук, врач-лаборант ФНЦ трансплантологии и искусственных органов им. акад. В.И. Шумакова, врач-лаборант Клинической больницы № 1 Управления делами Президента РФ Адрес: 123182, Москва, ул. Щукинская, д. 1, тел.: (495) 491-35-05



Список литературы

1. Валпорт М. Иммунология. Пер. с англ. Под. ред. А. Ройта, Дж. Бростоффа, Д. Мейла. М.: Мир. 2000. С. 59–81.

2. Figueroa J.A., Densen P. Infection diseases associated with complement deficiencies. Clin. Microbiol. Rev. 1991; 4: 359–395.

3. Morgan B.P. Physiology and pathophysiology of complement: progress and trends. Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. 1995; 32: 265–298.

4. Rogers J., Cooper N.R., Webster S. et al. Complement activation by β-amyloid in Alzheimer disease. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992; 89: 10016–10020.

5. Klein M.A., Kaeser P.S., Schwarz P. et al. Complement facilitates early prion phatogenesis. Nat. Med. 2001; 7: 488–492.

6. Мейл Д. Иммунология. Пер. с англ. Под. ред. А. Ройта, Дж. Бростоффа, Д. Мейла. М.: Мир. 2000. С. 527–546.

7. D'Orazlo P., Rechnitz G.A. Ion electrode measurements of complement and antibody levels using marker-loaded sheep red blood cell ghosts. Anal. Chem. 1977; 49 (13): 2083–2086.

8. Haxby J.A., Gotze O., Muller-Eberhard H.J., Kinsky S.C. Release of trapped marker from liposomes by the action of purified complement components. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1969; 64: 290–298.

9. Скопинская С.Н., Ярков С.П. Липосомальный иммуноанализ. Иммунология. 1996; 2: 6–12.

10. Rongen H.A.H., Bult A., van Bennekom W.P. Liposomes and immunoassays. J. Immunol. Meth. 1997; 204: 105–133.

11. Masaki T., Okada N., Yasuda R., Okada H. Assay of complement activity in human serum using large unilamellar liposomes. J. Immunol. Meth. 1986; 123: 19–24.

12. Bowden R.W., Rising M., Akot G. et al. Homogeneous, liposome-based assay for total complement activity in serum. Clin. Chem. 1986; 32 (2): 275–278.

13. Tatsu Y., Yamamura S., Yoshikawa S. Fluorescent fiber-optic immunosensing system based on complement lysis of liposome containing carboxyfluorescein. Biosenssors & Bioelectronics. 1992; 7: 741–745.

14. Szoka F., Papahadjopoulos D. Procedure for preparation of liposomes with large internal aqueous space and high capture by reverse-phase evaporation. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1978; 75 (9): 4194–4198.

15. Скопинская С.Н., Ярков С.П., Храмов Е.Н., Злобин Е.Н. Сульфородамин 101 — новый эффективный маркер в липосомальном иммуноанализе. Вестник РАМН. 2000; 10: 19–24.

16. Ohsawata T., Miura H., Harada K. Improvement of encapsulation efficiency of water-soluble drugs in liposomes formed by the freeze-thawing method. Chem. Pharm. Bull. 1985; 33 (9): 3945–3952.

17. Vaskovsky V.E., Kostetsky E.Y., Vasendin I.M. A universal reagent for phospholipids analysis. J. Chromatograph. 1975; 114: 129–141.


Для цитирования:


Скопинская С.Н., Ярков С.П., Храмов Е.Н., Анташев А.В. РАЗРАБОТКА МЕТОДА ОЦЕНКИ ОБЩЕЙ АКТИВНОСТИ КОМПЛЕМЕНТА НА ОСНОВЕ КОМПЛЕМЕНТЗАВИСИМОГО ИММУННОГО ЛИЗИСА ЛИПОСОМ. Вестник Российской академии медицинских наук. 2014;69(3-4):24-30. https://doi.org/10.15690/vramn.v69.i3-4.991

For citation:


Skopinskaya S.N., Yarkov S.P., Khramov E.N., Antashev A.V. THE DEVELOPMENT OF TOTAL COMPLEMENT ACTIVITY ASSAY BASED ON COMPLEMENT-DEPENDENT IMMUNE LIPOSOME LYSIS. Annals of the Russian academy of medical sciences. 2014;69(3-4):24-30. (In Russ.) https://doi.org/10.15690/vramn.v69.i3-4.991

Просмотров: 203


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0869-6047 (Print)
ISSN 2414-3545 (Online)