РАЗРАБОТКА МЕТОДА ОЦЕНКИ ОБЩЕЙ АКТИВНОСТИ КОМПЛЕМЕНТА НА ОСНОВЕ КОМПЛЕМЕНТЗАВИСИМОГО ИММУННОГО ЛИЗИСА ЛИПОСОМ

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Цель исследования: создать быстрый и воспроизводимый способ определения общей активности комплемента (total complement activity, ТСА) в сыворотке крови человека и животных. Материалы и методы: получены устойчивые при хранении препараты липосом, поверхность которых сенсибилизирована 2,4-ДНФ гаптенами, а внутренний объем заполнен кальцеином или сульфородамином 101. Исследованы закономерности иммунного комплементзависимого лизиса липосом в присутствии анти-2,4-ДНФ иммуноглобулинов и препаратов комплемента животных. Результаты: показано, что степень иммунного лизиса зависит от концентрации комплемента, что может быть использовано для определения уровня ТСА. Исследование сывороток крови пациентов продемонстрировало корреляцию данных (r =0,793), полученных с помощью липосомной иммунолитической системы, и нефелометрического анализа с применением суспензии эритроцитов. Выводы: метод позволяет определять активность комплемента в сыворотках крови в широком диапазоне за временной интервал 15 мин без разделения компонентов реакции, что может быть полезно для определения уровня ТСА у пациентов с различными заболеваниями и при проведении научных исследований. 

Об авторах

С. Н. Скопинская

ГосНИИ биологического приборостроения, Москва, Российская Федерация

Автор, ответственный за переписку.
Email: diasol@dol.ru

кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник отдела спектральных методов анализа ГосНИИ биологического приборостроения
Адрес: 125424, Москва, Волоколамское ш., д. 75, тел.: (495) 491-86-83

Россия

С. П. Ярков

ГосНИИ биологического приборостроения, Москва, Российская Федерация

Email: diasol@dol.ru

доктор биологических наук, начальник отдела спектральных методов анализа ГосНИИ биологического приборостроения
Адрес: 125424, Москва, Волоколамское ш., д. 75, тел.: (495) 491-86-83

Россия

Е. Н. Храмов

ГосНИИ биологического приборостроения, Москва, Российская Федерация

Email: niibp@dol.ru
доктор технических наук, профессор, директор ГосНИИ биологического приборостроения
Адрес: 125424, Москва, Волоколамское ш., д. 75, тел.: (495) 491-73-72 Россия

А. В. Анташев

ФНЦ трансплантологии и искусственных органов им. акад. В.И. Шумакова, Москва, Российская Федерация

Email: artem72antashev@mail.ru

кандидат медицинских наук, врач-лаборант ФНЦ трансплантологии и искусственных органов им. акад. В.И. Шумакова, врач-лаборант Клинической больницы № 1 Управления делами Президента РФ Адрес: 123182, Москва, ул. Щукинская, д. 1, тел.: (495) 491-35-05

Россия

Список литературы

  1. Валпорт М. Иммунология. Пер. с англ. Под. ред. А. Ройта, Дж. Бростоффа, Д. Мейла. М.: Мир. 2000. С. 59–81.
  2. Figueroa J.A., Densen P. Infection diseases associated with complement deficiencies. Clin. Microbiol. Rev. 1991; 4: 359–395.
  3. Morgan B.P. Physiology and pathophysiology of complement: progress and trends. Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. 1995; 32: 265–298.
  4. Rogers J., Cooper N.R., Webster S. et al. Complement activation by β-amyloid in Alzheimer disease. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992; 89: 10016–10020.
  5. Klein M.A., Kaeser P.S., Schwarz P. et al. Complement facilitates early prion phatogenesis. Nat. Med. 2001; 7: 488–492.
  6. Мейл Д. Иммунология. Пер. с англ. Под. ред. А. Ройта, Дж. Бростоффа, Д. Мейла. М.: Мир. 2000. С. 527–546.
  7. D'Orazlo P., Rechnitz G.A. Ion electrode measurements of complement and antibody levels using marker-loaded sheep red blood cell ghosts. Anal. Chem. 1977; 49 (13): 2083–2086.
  8. Haxby J.A., Gotze O., Muller-Eberhard H.J., Kinsky S.C. Release of trapped marker from liposomes by the action of purified complement components. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1969; 64: 290–298.
  9. Скопинская С.Н., Ярков С.П. Липосомальный иммуноанализ. Иммунология. 1996; 2: 6–12.
  10. Rongen H.A.H., Bult A., van Bennekom W.P. Liposomes and immunoassays. J. Immunol. Meth. 1997; 204: 105–133.
  11. Masaki T., Okada N., Yasuda R., Okada H. Assay of complement activity in human serum using large unilamellar liposomes. J. Immunol. Meth. 1986; 123: 19–24.
  12. Bowden R.W., Rising M., Akot G. et al. Homogeneous, liposome-based assay for total complement activity in serum. Clin. Chem. 1986; 32 (2): 275–278.
  13. Tatsu Y., Yamamura S., Yoshikawa S. Fluorescent fiber-optic immunosensing system based on complement lysis of liposome containing carboxyfluorescein. Biosenssors & Bioelectronics. 1992; 7: 741–745.
  14. Szoka F., Papahadjopoulos D. Procedure for preparation of liposomes with large internal aqueous space and high capture by reverse-phase evaporation. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1978; 75 (9): 4194–4198.
  15. Скопинская С.Н., Ярков С.П., Храмов Е.Н., Злобин Е.Н. Сульфородамин 101 — новый эффективный маркер в липосомальном иммуноанализе. Вестник РАМН. 2000; 10: 19–24.
  16. Ohsawata T., Miura H., Harada K. Improvement of encapsulation efficiency of water-soluble drugs in liposomes formed by the freeze-thawing method. Chem. Pharm. Bull. 1985; 33 (9): 3945–3952.
  17. Vaskovsky V.E., Kostetsky E.Y., Vasendin I.M. A universal reagent for phospholipids analysis. J. Chromatograph. 1975; 114: 129–141.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Издательство "Педиатръ", 2015



Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах