Preview

Вестник Российской академии медицинских наук

Расширенный поиск

Исследование протективных свойств рекомбинантного комплекса белка F наружной мембраны и анатоксина Pseudomonas aeruginosa

https://doi.org/10.15690/vramn584

Полный текст:

Аннотация

Pseudomonas aeruginosa вызывает осложнения после ожогов, травм и хирургических вмешательств, являясь одной из основных причин нозокомиальных инфекций. Этот патоген обладает высокой резистентностью к большинству антибактериальных средств, поэтому иммунопрофилактика рассматриваться как один из приоритетных подходов для борьбы с синегнойной инфекцией. Цель исследования: Изучить защитные свойства рекомбинантного комплекса белка F наружной мембраны (OprF) и атоксической формы экзотоксина А (анатоксина) от экспериментальной синегнойной инфекции. Методы: Рекомбинантные белки, содержащие дополнительную шести гистидиновую последовательность, синтезировали в клетках Escherichia coli c помощью изопропил-b-d-тиогалактопиранозида (ИПТГ) и очищали методом аффинной хроматографии с использованием Ni-сефарозы. Препаратами рекомбинантных белков внутрибрюшинно иммунизировали мышей. В качестве адъюванта использовали гидроксид алюминия. Экспериментальное заражение осуществляли внутрибрюшинным введением живой вирулентной культуры P. aeruginosa штамма РА103. Результаты: При двукратной иммунизации мышей комплексом, содержащим 25 мкг OprF и 50 мкг анатоксина, выявлен наилучший протективный эффект (индекс эффективности защитных свойств в этом случае составил 4,0). Индексы эффективности для рекомбинантных белков, вводимых двукратно в тех же дозах по отдельности, соответствовали 2,0 для OprF и 2,3 для анатоксина и не увеличивались после трехкратной иммунизации животных. Уменьшенные в два раза доз (12,5 мкг OprF и 25 мкг анатоксина) при трехкратном введении способствовало увеличению выживаемости мышей иммунизированных отдельными белками (индексы эффективности: 3 для OprF и 3,5 для анатоксина), однако при введении комплекса белков в тех же дозах индекс эффективности не увеличивался и составил 2,8. Заключение: Показано, что максимальный протективный эффект формируется в короткие сроки при использовании комплексной иммунизации двумя рекомбинантными белками OprF и анатоксином в дозах 25 и 50 мкг.

Об авторах

Алексей Алексеевич Калошин
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова, Москва
Россия

кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории протективных антигенов



Евгения Игоревна Леонова
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова, Москва
Россия

младший научный сотрудник лаборатории протективных антигенов 



Алена Владимировна Солдатенкова
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова, Москва
Россия

научный сотрудник лаборатории протективных антигенов



Наталья Александровна Михайлова
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова, Москва
Россия

доктор медицинских наук, профессор, заведующая лабораторией протективных антигенов, заместитель директора по научной работе



Список литературы

1. Falagas ME, Koletsi PK, Bliziotis IA. The diversity of definitions of multidrug-resistant (MDR) and pandrug-resistant (PDR) Acinetobacter baumannii and Pseudomonas aeruginosa. J Med Microbiol. 2006;55(12):1619–1629. doi: 10.1099/jmm.0.46747-0

2. Strateva T, Yordanov D. Pseudomonas aeruginosa ― a phenomenon of bacterial resistance. J Med Microbiol. 2009;58(9):1133–1148. doi: 10.1099/jmm.0.009142-0.

3. Бобровничий В.И. Современные подходы к диагностике и лечению синегнойной инфекции у больных муковисцидозом // Медицинский журнал. – 2012. – No1. – С. 4–9. [Bobrovnichii VI. Modern approaches to diagnosis and treatment of Pseudomonas aeruginosa infection in a patient with cystic fibrosis. Meditsinskii zhurnal. 2012;1:4–9. (In Russ).]

4. Мороз А.Ф. Применение поливалентной вакцины с защитным эффектом против Pseudomonas aeruginosa / Сб. материалов Всесоюзной конференции по ранам и раневой инфекции. – М.; 1977. С. 73–74. [Moroz AF. Primenenie polivalentnoi vaktsiny s zashchitnym effektom protiv Pseudomonas aeruginosa. (Conference proceedings) Sb. materialov Vsesoyuznoi konferentsii po ranam i ranevoi infektsii. Moscow; 1977. p. 73–74. (In Russ).]

5. Станиславский Е.С. и др. Бесклеточная псевдомонас-вакцина. Лабораторные испытания эффективности экспериментальных псевдомонас-вакцин // Журнaл микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. – 1982. – No10. – С. 25–29. [Stanislavskii ES, et al. Beskletochnaya psevdomonas-vaktsina. Laboratornye ispytaniya effektivnosti eksperimental’nykh psevdomonas-vaktsin. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunologii. 1982;10:25–29. (In Russ).]

6. Макаренко Т.А., Станиславский Е.С. Иммунологическое изучение белков клеточной стенки Pseudomonas aeruginosa // Журнaл микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. – 1996. – No2. – С. 7–9. [Makarenko TA, Stanislavskii ES. Immunologicheskoe izuchenie belkov kletochnoi stenki Pseudomonas aeruginosa. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunologii. 1996;2:7–9. (In Russ).]

7. Kim DK, Kim JJ, Kim JH, et al. Comparison of two immunization schedules for a Pseudomonas aeruginosa outer membrane proteins vaccine in burn patients. Vaccine. 2000;19(9–10):1274–1283. doi:10.1016/S0264-410X(00)00235-8

8. Krishnan S, Prasadarao NV. Outer membrane protein A and OprF ― Versatile roles in Gramnegative bacterial infections. FEBS Journal. 2012;279(6):919–931. doi: 10.1111/j.1742-4658.2012.08482.x.

9. Калошин А.А., Гатыпова Е.В., Михайлова Н.А. Получение рекомбинантных форм белка F наружной мембраны (OprF) Pseudomonas aeruginosa и исследование их иммуногенных свойств // Биотехнология. – 2011. – No2. – С. 74–84. [Kaloshin AA, Gatypova EV, Mikhailova NA. Obtaining of Recombinant Forms of Outer Membrane Protein F from Pseudomonas aeruginosa and Assessment of their Immunogenic Properties. Biotekhnologiia (Mosc.). 2011;2:74–84. (In Russ).]

10. Вертиев Ю.В., Бродвинова Н.С., Мороз A.Ф. Экзотоксин А Pseudomonas aeruginosa и его роль в патогенезе синегнойной инфекции // Журнал микробиологии эпидемиологии и иммунологии. – 1981. – No2. – С. 13–19. [Vertiev YV, Brodvinova NS, Moroz AF. Ekzotoksin A Pseudomonas aeruginosa i ego rol’ v patogeneze sinegnoinoi infektsii. Zhurnal mikrobiologii epidemiologii i immunologii. 1981;2:13–19. (In Russ).]

11. Калошин А.А., Исаков М.А., Михайлова Н.А., Вертиев Ю.В. Получение рекомбинантной атоксической формы экзотоксина А Pseudomonas aeruginosa // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 2012. – Т. 154. – No9. – С. 330–335. [Kaloshin AA, Isakov MA, Mikhailova NA, Vertiev JV. Preparation of Recombinant Atoxic Form of Exotoxin A from Pseudomonas Aeruginosa. Bull Exp Biol Med. 2013;154(3):346-350.] doi: 10.1007/ s10517-013-1947-1

12. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. – Л.: Медицинская литература; 1962. 180 с. [Ashmarin IP, Vorob’ev AA. Statisticheskie metody v mikrobiologicheskikh issledovaniyakh. Leningrad: Meditsinskaya literatura; 1962. 180 p. (In Russ).]


Для цитирования:


Калошин А.А., Леонова Е.И., Солдатенкова А.В., Михайлова Н.А. Исследование протективных свойств рекомбинантного комплекса белка F наружной мембраны и анатоксина Pseudomonas aeruginosa. Вестник Российской академии медицинских наук. 2016;71(1):5-10. https://doi.org/10.15690/vramn584

For citation:


Kaloshin A.A., Leonova E.I., Soldatenkova A.V., Mikhaylova N.A. Assessment of Protective Properties of the Recombinant Complex of the Outer Membrane Protein F and the Toxoid of Pseudomonas aeruginosa. Annals of the Russian academy of medical sciences. 2016;71(1):5-10. (In Russ.) https://doi.org/10.15690/vramn584

Просмотров: 548


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0869-6047 (Print)
ISSN 2414-3545 (Online)