РАЗРАБОТКА КОЛИЧЕСТВЕННЫХ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИХ ТЕСТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МАРКЕРОВ СОМАТИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Целью работы являлось создание иммунохроматографических тестов (ИХТ)   для определения в сыворотке (плазме) крови маркеров соматических заболеваний: иммуноглобулина Е (IgE), С-реактивного белка (СРБ) и D-димера фибрина,  а также изучение возможности их количественного иммунохроматографического анализа,  осуществляемого с помощью  видеоцифровых  анализаторов отечественной разработки «Рефлеком» и «Зондаж». ИХТ были сконструированы в «сэндвич» формате, с применением конъюгатов наночастиц коллоидного золота (средний размер 30±5 нм) и моноклональных антител. Показано, что калибровочные кривые, полученные при помощи ИХТ  и приборов видеоцифровой регистрации, хорошо аппроксимируются экспоненциальной зависимостью Y=Aexp(–x/B)+y0, , где Y-показания прибора, х-концентрация аналита, А, В, у0–константы. Исследовали  образцы сыворотки (плазмы) крови, полученные в условиях стационара от больных. Показано, что концентрации аналитов в клинических образцах сыворотки (плазмы) крови, определенные с помощью электрохемилюминесцентного метода,  иммуноферментного анализа, с помощью технологии «MicroSlide», латекс-агглютинации  линейно кореллируют с концентрациями аналитов определенными иммунохроматографически. Чувствительность разработанных тестов составила- 7,5 МЕ/мл для IgE, 5,7 нг/мл для С-реактивного белка, 500 нг/мл для D-димера фибрина. Разработанный аналитический комплекс — видеоцифровой анализатор «Зондаж» и ИХТ для количественного определения концентраций IgE, D-димера фибрина и СРБ — может осуществлять клинические лабораторные исследования наряду с применяемыми в настоящее время иммунохимическими методами, используемыми в практике лабораторного дела.

 

Об авторах

С. И. Третьяков

Государственный научно-исследовательский институт биологического приборостроения ФМБА, Москва, Российская Федерация

Автор, ответственный за переписку.
Email: diasol@dol.ru
MD, leading research scientist of the department of spectral analysis methods of the Federal State Unitary Enterprise «State Scientific Research Institute of Biological Engineering» of the Federal Medical-Biology Agency. Address: build. 1, 75, Volokolamskoye Route, Moscow, 125424; tel.: (495) 491-86-83 Россия

Л. А. Башарова

Государственный научно-исследовательский институт биологического приборостроения ФМБА, Москва, Российская Федерация

Email: diasol@dol.ru
MD, senior research scientist of the department of spectral analysis methods of the Federal State Unitary Enterprise «State Scientific Research Institute of Biological Engineering» of the Federal Medical-Biology Agency. Address: build. 1, 75, Volokolamskoye Route, Moscow, 125424; tel.: (495) 491-86-83 Россия

С. П. Ярков

Государственный научно-исследовательский институт биологического приборостроения ФМБА, Москва, Российская Федерация

Email: diasol@dol.ru
PhD, head of the department of spectral analysis methods of the Federal State Unitary Enterprise «State Scientific Research Institute of Biological Engineering» of the Federal Medical-Biology Agency. Address: build. 1, 75, Volokolamskoye Route, Moscow, 125424; tel.: (495) 491-86-83 Россия

А. А. Титов

Государственный научно-исследовательский институт биологического приборостроения ФМБА, Москва, Российская Федерация

Email: diasol@dol.ru
junior research scientist of the department of spectral analysis methods of the Federal State Unitary Enterprise «State Scientific Research Institute of Biological Engineering» of the Federal Medical-Biology Agency. Address: build. 1, 75, Volokolamskoye Route, Moscow, 125424; tel.: (495) 491-86-83 Россия

Е. Н. Храмов

Государственный научно-исследовательский институт биологического приборостроения ФМБА, Москва, Российская Федерация

Email: niibp@dol.ru
PhD, director of the Federal State Unitary Enterprise «State Scientific Research Institute of Biological Engineering» of the Federal Medical-Biology Agency. Address: build. 1, 75, Volokolamskoye Route, Moscow, 125424; tel.: (495) 491-73-72 Россия

Список литературы

  1. Lateral flow immunoassay. R.C. Wong, H.Y. Tse. (eds.). N.Y., Humana Press, Science &Business Media, 2009. 223 p.
  2. Starovoitova T.A., Zaiko V.V., Steriopolo N.A., Kalacheva O.S., Martynkina L.P., Kutvitskii V.A. et al. Video digital analysis laboratory diagnostics: complex "Expert-Lab" on the basis of the scanner to document, objectification and recording latex agglutination, gemagglyutinatsionnyh tests and immunoassays isoserological research. Laboratoriya = Laboratory. 2006; 1: 19–22.
  3. Zayko V.V., Martynkina L.P., Steriopolo N.A., Kalacheva O.S., Kutvitskiy V.A., Tugoloukov A.E. et al. Analytical characteristics microarray semiquantitative method for the production of latex tests with video digital recording. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Clinical Diagnostic Laboratory. 2008; 6: 17–20.
  4. Golubev S.S., Dzantiev B.B. Zherdev A.V., Kiseleva Yu.V., Korolenko Ya.A., Kudeyarov Yu.A., Malyuchenko V.M., Smirnova N.I., Sotnikov D.V. he method of calibration curves for immunochromatographic rapid test. Part 1. Immunochromatographic rapid test with colloidal gold. Metrologiya = Metrology. 2012; 10: 14–29.
  5. Berlina A.N., Vengerov Yu.Yu., Golubev S.S., Dzantiev B.B. Zherdev A.V., Kiseleva Yu.V., Korolenko Ya.A., Kudeyarov Yu.A., Malyuchenko V.M., Taranova N.A. The method of calibration curves for immunochromatographic rapid test. Part 2. Immunochromatographic rapid tests with quantum dots. Metrologiya = Metrology. 2012; 10: 31–41.20–22.
  6. Frens G. Controlled nucleation for the regulation of the partical size in monodisperse gold solution. Nature Phys. Sci. 1973; 241: 20–22.
  7. Byzova N.A., Safenkova I.V., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Comparative characteristics of colloidal gold nanoparticles of different sizes as carriers and markers in immunoassay analysis. Estestvennyye i tekhnicheskiye nauki = Technical and Natural Sciences. 2012; 1: 62–71.
  8. Titov A.A., Shilenko I.V., Morozov A.A., Yarkov S.P., Zlobin V.N. Development and optimization of immunoassay for the detection of botulinum toxins. Prikladnaya biokhimiya i mikrobiologiya = Applied Biochemistry and Microbiology. 2012; 48(2): 249–256.
  9. Taranova N.A., Berlina A.N., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Quantitative immunoassay determination of total IgE in human serum using different methods of approximation of calibration dependence. Sovremennyye problemy nauki i obrazovaniya = Problems of Modern Science and Education. 2012; 5. Available at: www/ science-education.ru/105–7168.
  10. Тiets N.U. Entsiklopediya klinicheskikh laboratornykh testov. [Encyclopedia of Clinical Laboratory Tests. Transl. from English. Edited by Men’shikova V.V.]. Мoscow, Labinform, 1997. 942 p.
  11. Patterson R., Grammer L., Greenberger P.А. Allergicheskiye bolezni: diagnostika i lecheniye. [Allergic Diseases Diagnosis and Treatment. Transl. from English. Edited by Chuchalina А.G., Gushchina I.S.]. Мoscow, GEOTAR-Меdiа, 2000. 768 p.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Издательство "Педиатръ", 1970



Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах