Морфологические особенности мезенхимальных клеток стромы ворсин хориона

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Обоснование. В настоящее время строма ворсин хориона является доступным материалом для получения и последующего культивирования мезенхимальных стромальных клеток (МСК). В связи с развитием персонифицированной медицины предпринимаются попытки культивирования аутологичных МСК из плаценты для лечения различных заболеваний матери и плода. Цель исследования: оценить возможность выделения и использования ткани плаценты для получения мезенхимальных стромальных клеток. 

Методы. Настоящее исследование было проведено на образцах плацент от 45 беременных женщин в возрасте 27−38 лет, на сроке гестации 36−40 нед, подвергнутых оперативному родоразрешению. В основную группу были включены 30 женщин, дети которых родились с врожденными пороками развития (ВПР). Группу сравнения составили 15 пациенток с физиологическим течением беременности без пороков развития. На серийных парафиновых срезах было выполнено гистологическое (окраска гематоксилином и эозином), атакже иммуногистохимическое исследование с применением первичных моноклональных антител к МСК CD90 (1:25; Abcam, Великобритания), СD105 (1:500; Abcam, Великобритания), CD44 (1:25; Dako, Дания), СD73 (1:200, Abcam, Великобритания). Кроме того, 15 образцов были исследованы с применением трансмиссионной электронной микроскопии (Philips/FEI Corporation, Eindhoven, Голландия). Количественная оценка интенсивности окрашивания была проведена в клетках стромы промежуточных ворсин с помощью программы обработки изображений NIS-Elements (Czech Republic) для микроскопа Nikon Eclipse 80i. При сравнении средних величин нами использовался t-критерий Стьюдента. Критический уровень значимости различий между группами был принят равным <0,05. 

Результаты. В результате гистологического исследования образцов, окрашенных гематоксилином и эозином, было отмечено значительное фиброзирование стромы, отставание развития ворсинчатого дерева ворсин плаценты в группе с ВПР (p<0,01). При иммуногистохимическом исследовании в строме стволовых ипромежуточных ворсин хориона не выявлено значимого различия между группами в интенсивности окрашивания CD73+, CD90+ и CD44+-клеток (р>0,05). При анализе экспрессии CD105 в строме промежуточных ворсин определялось значимое снижение окрашивания в группе ВПР (0,058±0,0049) в отличие от группы сравнения (0,088±0,0039) (р<0,05). При электронной микроскопии обнаружено, что интерстициальные клетки стромы ворсин при ВПР имели фибробластическую дифференцировку.

Заключение. Таким образом, для получения клеточной культуры необходимо исключать образцы плацент от пациенток с отягощенным акушерском анамнезом, патологией матери и плода. При врожденной патологии плода выделять из плаценты для культивирования МСК нецелесообразно, и следует, вероятно, воспользоваться донорскими клетками. При выборе образца для культивирования следует ориентироваться на морфологическое строение плаценты. 

Об авторах

Наталья Викторовна Низяева

Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова

Автор, ответственный за переписку.
Email: Niziaeva@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-5592-5690

Кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник патологоанатомического отделения.

Адрес: 117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4

SPIN: 9893-2630

Россия

Т. В. Сухачёва

Научный центр сердечно-сосудистой хирургии имени А.Н. Бакулева

Email: tatiana@box.ru
ORCID iD: 0000-0001-6127-8688

Кандидат биологических наук, старший научный сотрудник отдела патологической анатомии.

Адрес: 121552, Москва, Рублевское ш., д. 135

SPIN: 9948-1550

Г. В. Куликова

Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова

Email: Gvkilikova@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-0594-955X

Кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник патологоанатомического отделения.

Адрес: 117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4

SPIN-код: 9533-2649

Марина Николаевна Наговицына

Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова

Email: moremore84@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-8039-6217

Младший научный сотрудник патологоанатомического отделения.

Адрес: 117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4

SPIN-код: 1602-8865

Наталья Енкыновна Кан

Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова

Email: n_kan@oparina4.ru
ORCID iD: 0000-0001-5087-5946

Доктор медицинских наук, заведующая акушерским обсервационным отделением.

Адрес: 117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4

SPIN-код: 5378-8437

Олег Радомирович Баев

Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова

Email: o_baev@oparina4.ru
ORCID iD: 0000-0001-8572-1971

Доктор медицинских наук, профессор, заведующий родильным отделением.

Адрес: 117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4

SPIN-код: 5058-7295

Станислав Владиславович Павлович

Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова

Email: s_pavlovich@oparina4.ru
ORCID iD: 0000-0002-1313-7079

Кандидат медицинских наук, доцент, ученый секретарь Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова; заведующий учебной частью, профессор кафедры акушерства, гинекологии, перинатологии и репродуктологии ИПО Первого МГМУ имени И.М. Сеченова.

SPIN-код: 2465-1317

Роман Андреевич Серов

Научный центр сердечно-сосудистой хирургии имени А.Н. Бакулева

Email: fake@neicon.ru
ORCID iD: 0000-0002-7962-7273

Доктор медицинских наук, профессор, заведующий отделом патологической анатомии.

Адрес: 121552, Москва Рублевское ш., д. 135

SPIN-код: 7946-0329

Александр Иванович Щёголев

Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова

Email: ashegolev@oparina4.ru
ORCID iD: 0000-0002-2111-1530

Доктор медицинских наук, профессор, заведующий патологоанатомическим отделением.

Адрес: 117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.

SPIN-код: 9061-5983

Римма Алексеевна Полтавцева

Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова

Email: rimpol@mail.ru

Кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории клинической иммунологии.

Адрес: 117997, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4

Список литературы

  1. Щеголев А.И., Дубова Е.А., Павлов К.А. Морфология плаценты. — М.; 2010. — 48 с. [Shchegolev AI, Dubova EA, Pavlov KA. Morfologiya platsenty. Moscow; 2010. 48 p. (In Russ).]
  2. Benirschke K, Burton GJ, Baergen RN, eds. Pathology of human placenta. 6th ed. New York (NY): Springer; 2012. 941 р. doi: 10.1007/978-3-642-23941-0.
  3. Полтавцева Р.А., Бобкова Н.В., Самохин А.Н., Сухих Г.Т. Влияние трансплантации мультипотентных мезенхимальных и нейральных стволовых клеток человека на память мышей с нейродегенерацией альцгеймеровского типа / Материалы II Национального конгресса по регенеративной медицине. Москва, 3−5 декабря 2015. — С. 148−149. [Poltavtseva RA, Bobkova NV, Samokhin AN, Sukhikh GT. Vliyanie transplantatsii mul’tipotentnykh mezenkhimal’nykh i neiral’nykh stvolovykh kletok cheloveka na pamyat’ myshei s neirodegeneratsiei al’tsgeimerovskogo tipa. (Congress proceedigs) II national congress on regenerative medicine; 2015 Dec 3−5; Moscow. p. 148−149. (In Russ).] Доступно по: http://www.mediexpo.ru/fileadmin/user_upload/content/pdf/thesis/thesis_nkrm2015.pdf. Ссылка активна на 12.12.2016.
  4. Romanov YA, Balashovа EE, Volgina NE, et al. Optimized protocol for isolation of multipotent mesenchymal stromal cells from human umbilical cord. Bulletin of experimental biology and medicine. 2015;160(1):148–154. doi: 10.1007/s10517-015-3116-1.
  5. Rylova YV, Milovanova NV, Gordeeva MN, Savilova AM. Characteristics of multipotent mesenchymal stromal cells from human terminal placenta. Bulletin of experimental biology and medicine. 2015;159(2):253–257. doi: 10.1007/s10517-015-2935-4.
  6. Сухачева Т.В., Егорова И.Ф., Серов Р.А. Морфологические особенности миокарда правого предсердия больных ишемической болезнью сердца // Бюллетень НЦССХ им. А.Н. Бакулева РАМН: Сердечно-сосудистые заболевания. — 2005.— Т.6. — №5 — С. 13−19. [Sukhacheva TV, Egorova IF, Serov RA. Morfologicheskie osobennosti miokarda pravogo predserdiya bol’nykh ishemicheskoi bolezn’yu serdtsa. Serdechno-sosudistye zabolevaniya: Byulleten’ NTsSSKh im. A.N. Bakuleva RAMN. 2005;6(5):13−19. (In Russ).]
  7. King BF. Ultrastructural and differentiation of stromal and vascular components in early macaque placental villi. Am J Anat. 1987;178(1):30−44. doi: 10.1002/aja.1001780105.
  8. Challier JC, Galtier M, Kacemi A, Guillaumin D. Pericytes of term human foeto-placental microvessels: ultrastructure and visualization. Cell Mol Biol (Noisy-le-Grand). 1999;45(1):89−100.
  9. Castellucci M, Kaufmann P. A three-dimensional study of the normal human placental villous core: II. Stromal architecture. Placenta. 1982;3(3):269−285. doi: 10.1016/s0143-4004(82)80004-0.
  10. Feller AC, Schneider H, Schmidt D, Parwaresch MR. Myofibroblast as a major cellular constituent of villous stroma in human placenta. Placenta. 1985;6(5):405−415. doi: 10.1016/s0143-4004(85)80017-5.
  11. Kohnen G, Kertschanska S, Demir R, Kaufmann P. Placental villous stroma as a model system for myofibroblast differentiation. Histochem Cell Biol. 1996;105(6):415−429. doi: 10.1007/bf01457655.
  12. Suciu L, Popescu LM, Gherghiceanu M, et al. Telocytes in human term placenta: morphology and phenotype. Cells Tissues Organs. 2010;192(5):325−339. doi: 10.1159/000319467.
  13. Низяева Н.В., Щеголев А.И., Марей М.В., Сухих Г.Т. Интерстициальные пейсмекерные клетки // Вестник Российской академии медицинских наук. — 2014. — Т.69. — №7−8 — С. 17−24. [Nizyaeva NV, Marei MV, Sukhikh GT, Shchegolev AI. Interstitial pacemaker cells. 2014;69(7−8):17−24. Annals of the Russian academy of medical sciences. 2014;69(7−8):17−24. (In Russ.)] doi: 10.15690/vramn.v69i7-8.1105.
  14. Niziaeva N, Sukhacheva T, Kulikova G, et al. Ultrastructure features of placenta villi in cases of preeclampsia. Virchows Arch. 2016;469(Suppl 1):S184.
  15. Popescu LM, Nicolescu MI. Chapter 11 - Тelocytes and stem cells. In: Goldenberg RCS, de Carvalho ACC, editors. Resident stem cells regenerative therapy. Elsevier Inc: Academic Press; 2013. pp. 205–231.
  16. Díaz-Flores L, Gutiérrez R, García PM, et al. Telocytes as a source of progenitor cells in regeneration and repair through granulation tissue. Curr Stem Cell Res Ther. 2016;11(5):395−403. doi: 10.2174/1574888X10666151001115111.
  17. Низяева Н.В., Наговицына М.Н., Куликова Г.В., и др. Условия получения образцов ткани плаценты для культивирования мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2016. — Т.162. — №10 — С. 500–506. [Nizyaeva NV, Nagovitsyna MN, Kulikova GV, et. al. The conditions taking samples from placenta tissue for following cultivation of multipotent mesenchimal stromal cells. Biull Eksp Biol Med. 2016;162(10):500−506. (in Russ)].
  18. Kim MJ, Romero R, Kim CJ, et al. Villitis of unknown etiology is associated with a distinct pattern of chemokine up-regulation in the feto-maternal and placental compartments: implications for conjoint maternal allograft rejection and maternal anti-fetal graft-versus-host disease. J Immunol. 2009;182(6):3919−3927. doi: 10.4049/jimmunol.0803834.
  19. Gao Z, Dong K, Zhang H. The roles of CD73 in cancer. Biomed Res Int. 2014;2014:460654. doi: 10.1155/2014/460654.
  20. Kumar A, Bhanja A, Bhattacharyya J, Jaganathan BG. Multiple roles of CD90 in cancer. Tumour Biol. 2016;37(9):11611−11622. doi: 10.1007/s13277-016-5112-0.
  21. Mark A, DeWitt MA, Magis W, Bray NL, et al. Selection ― free genome editing of the sickle mutation in human adult hematopoetic stem/progenitor cells. Sci Transl Med. 2016;8(360):360ra134. doi: 10.1126/scitranslmed.aaf9336.
  22. Redline RW. Villitis of unknown etiology: noninfectious chronic villitis in the placenta. Hum Pathol. 2007;38(10):1439−1446. doi: 10.1016/j.humpath.2007.05.025.
  23. Андронова Н.В., Зарецкая Н.В., Ходжаева З.С., и др. Патология плаценты при хромосомных аномалиях у плода // Акушерство и гинекология. — 2014. — №3 — С. 4–8. [Andronova NV, Zaretskaya NV, Khodzhaeva ZS, et al. Placental pathology in fetal chromosome abnormalities. Akush Ginekol (Mosk). 2014;(3):4−8. (In Russ).]
  24. Зарецкая Н.В., Муравенко О.В., Низяева Н.В., и др. Соматический тканевой хромосомный мозаицизм у монозиготной тройни в сочетании с ранней преэклампсией // Акушерство и гинекология. ― 2016. — №7 — C. 111–118. [Zaretskaya NV, Muravenko OV, Nizyaeva NV, et al. Somatic tissue chromosomal mosaicism in monozygotic triplets concurrent with early preeclampsia. Akush Ginekol (Mosk). 2016;(7):111−118. (In Russ).] doi: 10.18565/aig.2016.7.111-118.
  25. Туманова У.Н., Низяева Н.В., Шувалова М.П., Щеголев А.И. Роль патологии плаценты в развитии перинатальной смерти от врожденных аномалий / Сборник тезисов Всероссийской конференции: «Мать и дитя». Москва, 27–30 сентября, 2016. — C. 107–108. [Tumanova UN, Nizyaeva NV, Shuvalova MP, Shchegolev AI. Rol’ patologii platsenty v razvitii perinatal’noi smerti ot vrozhdennykh anomalii. (Conference proceedigs) Russian Conference: «Mother and child». 2016 Sep 27–30; Moscow. p. 107–108. (In Russ).] Доступно по: http://mediexpo.ru/fileadmin/user_upload/content/pdf/thesis/thesis_md16.pdf. Ссылка активна на 12.12.2016.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Издательство "Педиатръ", 2017



Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах