Objective: Our aim was to study the mechanisms of hypoxia development at pregnancy associated with cytomegalovirus infection (CMVI). Methods: 30 parturient women with CMVI relapse at the 25–28 weeks of pregnancy and their newborns were examined. Cytochrome C, Hsp-70, p53, Bcl-2 and caspase-3 in placenta homogenate were found out with serologic methods, the morphology of erythrocytes with cytophotometry, erythrocytes membrane proteins with disc-electrophoresis method, TBA-active products with V.B. Gavrilov’s method, superoxide dismutase activity withspectrophotometry, 2.3-diphosphoglyceric acid (2.3 DPG) with I.S. Luganov’s method, erythrocytes membrane microviscosity with fluorimethric method, oxyhemoglobin and methemoglobin with Evelyn and Malloy’ method, and erythrocytes deformability with M.T. Lutsenko’s method. Results: In blood erythrocytes of CMV-seropositive parturient women there was the decrease of cytoskeleton proteins: α- and β-spectrine was1.14 times less, ankyrin was 1.62 times less, band 4.1 protein was 1.29 times less; there was 1.87 times increase of antigen-binding glycophorin, 1.37 times growth of TBA-active products and 1.35 times drop of superoxide dismutase activity; the deformability index was 9.5 times less, 2.3 DPG was 1.22 times less and oxyhemoglobin was 1.06 times less. In placenta homogenate Bcl-2 was 1.5 times less, Hsp-70 was 2.5 times more, p53 was 6.1 times more, cytochrome C was 1.76 times more, caspase-3 was 3.86 times more. In umbilical cord blood erythrocytes 2.3 DPG was 1.3 times more and oxyhemoglobin was 1.06 times less. Conclusion: The obtained data proves that CMVI relapse at 25–28 weeks of pregnancy causes the disorder of morphofunctional state of mother’s blood erythrocytes and their ability to oxygenation, the development of fetoplacental barrier, the decrease of fetus oxygen blood supply and the development of intrauterine hypoxia.
Цель исследования: изучить механизмы формирования гипоксии при ЦМВ ассоциированной беременности. Методы: обследовано 30 рожениц с рецидивом цитомегаловирусной инфекции на сроке 25-28 недель гестации и их новорожденных. Рецидив ЦМВИ устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG к ЦМВ в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности антител класса IgG к ЦМВ более 65%, ДНК ЦМВ методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Критерии включения: лабораторно подтвержденный молекулярно-биологическими и серологическими методами исследования рецидив ЦМВИ на сроке 25-28 недель гестации, наличие в периферической крови на момент исследования титра антител IgG к ЦМВ 1:1600, стойкая ремиссия герпесвирусной инфекции на протяжении всего срока гестации. Активность цитохрома С, Hsp-70, белков p53, Bcl-2 и каспазы 3 определяли в гомогенате плаценты иммуноферментным методом анализа. Морфологию эритроцитов (площадь поверхности, средний диаметр) изучали цитофотометрически на аппарате «Mekos» (МЗ РФ 29/10010198/1282-01). Белковый состав мембран эритроцитов определяли методом диск-электрофореза (Bion Doc Analize, Германия). ТБК-активные продукты определяли по методу В.Б. Гаврилова, Гаврилова А.Р., Мажуль Л.М.. Оценка активности супероксиддисмутазы спектрофотометрическим методом. Содержание 2,3-ДФГ в эритроцитах изучали по методу И.С. Луганова и М.Н. Блиновой. Микровязкость мембран эритроцитов — на флюороспектрофотометре Hitachi (Япония). Содержание оксигемоглобина и метгемоглобина — по методу Эвелина и Мэллой. Деформабельность эритроцитов изучали путем математического анализа, разработанного М.Т. Луценко (Патент № 2407452, Бюллетень «Изобретений и полезных моделей» №28). Результаты: при рецидиве цитомегаловирусной инфекции в периферической крови беременной отмечено нарушение морфофункционального состояния эритроцитов (снижение содержания α-спектрина до 6,9±0,11%, β-спектрина до 7,67±0,10%, анкирина до 3,10±0,15%, белка полосы 4.1 до 3,43±0,17%, увеличение гликофорина до 9,73±0,3%, повышение уровня ТБК-активных продуктов до 28,15±0,97 ммоль/л, лизофосфотидилхолина до 9,90±0,58%, снижение противоокислительной активности супероксиддисмутазы до 230,37±2,51 Ед/г Hb, снижение параметров флюоресценции липотропного зонда пирен до 0,60±0,05, индекса деформабельности клеток до 0,02±0,008 усл.ед.). Увеличено содержание 2,3-ДФГ до 7,05±0,07 мкмоль/мл и снижено содержание оксигенированной формы гесоглобина до 90,20±0,47%. Одновременно происходят морфофункциональные нарушения и в синцитиотрофобласте ворсинок плаценты: снижение содержания белка Bcl-2 до 28,14±0,78 пг/мл и Hsp-70 до 22,30±0,90 нг/мл, увеличение количества белка р53 до 4,52±0,16 Ед/мл, а также цитохрома С до 18,8±0,8 пг/мл и каспазы-3 до103,7±3,9 нг/мл. В крови сосудов пуповины новорожденного отмечено нарастание в эритроцитах содержания 2,3-ДФГ до 6,51±0,10 мкмоль/мл и снижение уровня оксигемоглобина до 88,2±0,42% . Заключение: полученные данные свидетельствуют о том, что рецидив цитомегаловирусной инфекции на сроке 25-28 недель гестации нарушает морфофункциональное состояние эритроцитов и их способность к оксигенации в крови матери, строение фетоплацентарного барьера и снижает процессы оксигенации гемоглобина в эритроцитах плода, создавая угрозу формирования внутриутробной гипоксии плода.