Annals of the Russian academy of medical sciencesAnnals of the Russian academy of medical sciencesВестник Российской академии медицинских наук0869-60472414-3545"Paediatrician" Publishers LLC41310.15690/vramn.v69i7-8.1115PHARMACOLOGY AND PHARMACY: CURRENT ISSUESАКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ФАРМАКОЛОГИИ И ФАРМАЦИИNEW APPROACHES IN THE REGULATION OF BLOOD PHAGOCYTES AND REDUCTION IN THE FORMATION OF OXYGEN RADICALS IN PATIENTS WITH HEART FAILUREНОВЫЕ ПОДХОДЫ В РЕГУЛЯЦИИ АКТИВНОСТИ ФАГОЦИТОВ КРОВИ И СНИЖЕНИЕ ОБРАЗОВАНИЯ РАДИКАЛОВ КИСЛОРОДА У ПАЦИЕНТОВ С СЕРДЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮAstashkinE. I.АсташкинЕ. И.
Russian Federation

PhD, professor of Pathological Department, Head of the Laboratory of extreme states of Research Centre of I.M. Sechenov First MSMU

доктор биологических наук, профессор кафедры патологии, заведующий лабораторией экстремальных состояний НИЦ Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Адрес: 119992, Москва, ул. Трубецкая д. 8, стр. 1, тел.: +7 (495) 622-96-01

287ast@mail.ruGlezerM. G.ГлезерМ. Г.
Russian Federation

доктор медицинских наук, профессор кафедры профилактической и неотложной кардио- логии, заведующая лабораторией функциональных методов исследования и рациональной фармакотерапии сер- дечно-сосудистых заболеваний НИЦ Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Адрес: 119992, Москва, ул. Трубецкая д. 8, стр. 1, тел.: +7 (499) 972-96-12

287ast@mail.ruVinokurovM. G.ВинокуровМ. Г.
Russian Federation

доктор биологических наук, главный научный сотрудник лаборатории экстре- мальных состояний НИЦ Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Адрес: 119992, Москва, ул. Трубецкая д. 8, стр. 1, тел.: +7 (495) 622-96-01

287ast@mail.ruOrekhovaN. S.ОреховаН. С.
Russian Federation

кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории экстре- мальных состояний НИЦ Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Адрес: 119992, Москва, ул. Трубецкая д. 8, стр. 1, тел.: +7 (495) 622-96-01

287ast@mail.ruEgorovaN. D.ЕгороваН. Д.
Russian Federation

научный сотрудник лаборатории экстремальных состояний НИЦ Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Адрес: 119992, Москва, ул. Трубецкая д. 8, стр. 1, тел.: +7 (495) 622-96-01

287ast@mail.ruNovikovaA. N.НовиковаА. Н.
Russian Federation

лаборант-исследователь лаборатории экстремальных состояний НИЦ Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Адрес: 119992, Москва, ул. Трубецкая д. 8, стр. 1, тел.: +7 (495) 622-96-01

287ast@mail.ruYurinskayaM. M.ЮринскаяМ. М.
Russian Federation

кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории экстре- мальных состояний НИЦ Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Адрес: 119992, Москва, ул. Трубецкая д. 8, стр. 1, тел.: +7 (495) 622-96-01

287ast@mail.ruGrachevS. V.ГрачёвС. В.
Russian Federation

доктор медицинских наук, академик РАН, заведующий кафедрой патологии Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Адрес: 119992, Москва, ул. Трубецкая д. 8, стр. 1, тел.: +7 (499) 248-31-22

grachevscience@gmail.comSobolevK. E.СоболевК. Э.
Russian Federation

рациональной фармакотерапии сердечно-сосудистых заболеваний НИЦ Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Адрес: 119992, Москва, ул. Трубецкая д. 8, стр. 1, тел.: +7 (499) 972-96-12

287ast@mail.ruI.M. Sechenov First Moscow State Medical UniversityПервый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова,I.M. Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow, Russian FederationПервый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова, Российская Федерация02102014697-8Vestnik Rossiiskoi akademii medetsinskikh nauk / Annals of the Russian academy of medical sciencesВестник Российской академии медицинских наук10010507082015Copyright ©; 1970, "Paediatrician" Publishers LLCCopyright ©; 1970, Издательство "Педиатръ"1970"Paediatrician" Publishers LLCИздательство "Педиатръ"https://vestnikramn.spr-journal.ru/jour/about/submissionshttps://vestnikramn.spr-journal.ru/jour/article/view/413

Aim: The purpose was to study the effect of actovegin on the formation of reactive oxygen species by blood phagocytes of patients with heart failureand on SK-N-SH neuron necrosis. Materials and methods: The generation of superoxide anion (O2-•) were recorded on whole blood samples (50–100 μl). Change lucigenin-dependent hemiluminescence determined on a hemi-luminometer «Biotoks-7». As a stimulator of the phagocyte phorbol ester (PMA, 1 μm) was used. Necrosis of neurons induced by hydrogen peroxide was determined by fluorescence of propidium iodit. Results: Blood phagocytes of heart failure patients are initially pre-activated (primed). These cells spontaneous generated oxygen radicals. Actovegin dosadependent decreased radicals level and radical induced by PMA (1 μm). After PMA maximal inhibitory effect of actovegin observed in doses higher than 2–3 mg/ml. The impact of actovegin on the viability of human SK-N-SH neurons in the presence hydrogen peroxide (100 μm) was studied invitro. Under these conditions hydrogen peroxide triggered radical-dependent neurons necrosis Actovegin dosa-dependent decreased of neuron death.Conclusion: Actovegin inhibits spontaneous and induced formation of reactive oxygen species generated by blood phagocytes of patients with heart failure. Actovegin suppressed necrosis of human SK-N-SH neuroblastoma cells caused by hydrogen peroxide. It is assumed that actovegin protects cells of various organs and tissues, including blood cells and neurons that die as a result of ischemia and inflammation by reducing levels of reactive oxygen species.

Цель исследования: изучить влияние актовегина (гемодиализат крови телят) на образование радикалов кислорода фагоцитами крови у пациентов с сердечной недостаточностью (СН) II–III функционального класса по NYHA. Материалы и методы. Секрецию супероксиданионов (О2-•) регистрировали на образцах цельной крови (50–100 мкл) по изменению люцигенинзависимой хемилюминесценции на люминометре «Биотокс-7». В качестве стимулятора фагоцитов использовали форболовый эфир (РМА, 1 мкМ). Некроз нейронов, индуцированный пероксидом водорода, определяли по флуоресценции пропидия йодида. Результаты. Фагоциты крови пациентов с СН были исходно предактивированы (праймированы), о чем свидетельствует спонтанное образование радикалов кислорода в результате их взаимодействия с кюветой, а также выраженный последующий ответ на РМА. Впервые на образцах крови пациентов с СН установлено, что актовегин дозозависимым образом снижал спонтанную и РМА-индуцированную генерацию О2-•. Достоверный ингибиторный эффект наблюдали в дозе 2 мг/мл и выше. Актовегин тормозил, но не подавлял полностью ответ фагоцитов на РМА. Ишемия вызывала гибель нейронов в центральной нервной системе, в т.ч. в результате оксидативного стресса. На перевиваемых нейробластомных клетках человека линии SK-N-SH актовегин снижал гибель нейронов в результате некроза, индуцированного Н2О2 (100 мкМ). Выводы. Актовегин ингибирует спонтанное и индуцированное образование радикалов кислорода, генерируемых фагоцитами крови пациентов с сердечной недостаточностью. Препарат подавляет некроз нейробластомных клеток SK-N-SH человека, вызываемый пероксидом водорода. Высказано предположение, что актовегин защищает клетки различных органов и тканей человека, включая клетки крови и нейроны, погибающие в результате ишемии и воспаления, благодаря снижению уровня радикалов кислорода.

actoveginoxygen radicalsblood phagocytesneuroblastoma cellsnecrosisактовегинрадикалы кислородафагоциты кровинейробластоманекроз1. Remme W.J. Overview of the relationship between ischemia and congestive heart failure. Clin. Cardiol. 2000; 23 (Suppl. IV): IV-4–IV-8.2. Jordan J.E., Zhi-Qing Z., Vinten-Johansen J. The role of neutrophils in myocardial ischemia-reperfusion injury. Cardiovasc. Res. 1999; 43: 860–878.3. Chen Y.L., Junger W.G. Measurement of oxidative burst in neutrophils. Methods Mol. Biol. 2012; 844: 115–124.4. Асташкин Е.И., Глезер М.Г. Энергетический обмен сердца. Вып. 4. Гибель клеток при ишемии/реперфузии. Современные подходы к профилактике и лечению. М.: Медиком. 2011. С. 1–12.5. Tracchi I., Ghigliotti G., Mura M., Garibaldi S., Spallarossa P., Barisione Ch., Boasi V., Michele Brunelli M., Corsiglia L., Barsotti A., Brunelli C. Increased neutrophil lifespan in patients with congestive heart failure. Eur. J. Heart Failure. 2009; 11: 378–385.6. Wan-Jun L., Jian-Fang Q., Hai-He J. Pretreatment with aminophylline reduces release of Troponin I and neutrophil activation in the myocardium of patients undergoing cardioplegic arrest. Eur. J. Cardiothor. Surg., 2007; 31; 360–365.7. Maher B.M., Ni Dhonnchu T., Burke J.P., Soo A., Wood A.E., Watson R.W.G. Statins alter neutrophil migration by modulating cellular Rho activity — a potential mechanism for statins-mediated pleotropic effects? J. Leukocyte Biol. 2009; 5 (1): 186–193.8. Neumann J., Sauerzweig St., Ronicke R., Gunzer F., Dinkel K.L., Ullrich O., Gunzer M., Reymann K.G. Microglia cells protect neurons by direct engulfment of invading neutrophil granulocytes: A new mechanism of CNS immune privilege. J. Neurosci. 2008; 28 (23): 5965–5975.9. Machicao F., Muresanu D.F., Hundsberger M.H., Pfluger M., Guekht A. Pleiotrophic neuroprotective and metabolic effects of Actovegin’s mode of action. J. Neurol. Sci. 2012; 322 (1–2): 222–227.10. Lamb F.S., Hook J.S., Hilkin Br.M., Huber J.N., Volk A.P.D., Moreland J.G. Endotoxin priming of neutrophils requires endocytosis and NADPH oxidase-dependent endosomal reactive oxygen species. J. Biol. Chem. 2012; 287: 12395–12404.11. Bowler J.V. Vascular cognitive impairment. Stroke. 2004; 35 (2): 386–388.12. Small G.W. Vascular dementia:galantamine (Reminyl) as an emerging therapeutic option. Acta Neurol. Scand. 2002; 106 (Suppl. 178): 4–5.13. Gottsater A., Achmed M., Fernlund P. Autonomic neuroparty in type II diabetic patients is associated with hyperinsulinaemia and hypertriglyceridaemia. Diabet. Med. 1999; 16: 49–54.14. Dinkel K., Dhabhar F.S., Sapolsky R.M. Neurotoxic effects of polymorphonuclear granulocytes on hippocampal primary cultures. Roc Natl Acad Sci USA. 2004; 101 (1): 331–336.15. Elmlinger M.W., Kriebel M., Ziegler D. Neuroprotective and antioxidative effects of the hemodialysate actovegin on primary rat neurons in vitro. Neuromol. Med. 2011; 13 (4): 266–274.