Annals of the Russian academy of medical sciencesAnnals of the Russian academy of medical sciencesВестник Российской академии медицинских наук0869-60472414-3545"Paediatrician" Publishers LLC15010.15690/vramn.v68i9.780SHORT MESSAGESКРАТКИЕ СООБЩЕНИЯDEVELOPMENT OF THE QUANTITATIVE IMMUNOCHROMATOGRAPHY TESTS FOR SOMATIC DEASEASE MARKERS DETECTIONРАЗРАБОТКА КОЛИЧЕСТВЕННЫХ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКИХ ТЕСТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МАРКЕРОВ СОМАТИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙTret'yakovS. I.ТретьяковС. И.
Russian Federation

MD, leading research scientist of the department of spectral analysis methods of the Federal State Unitary Enterprise «State Scientific Research Institute of Biological Engineering» of the Federal Medical-Biology Agency. Address: build. 1, 75, Volokolamskoye Route, Moscow, 125424; tel.: (495) 491-86-83

diasol@dol.ruBasharovaL. A.БашароваЛ. А.
Russian Federation

MD, senior research scientist of the department of spectral analysis methods of the Federal State Unitary Enterprise «State Scientific Research Institute of Biological Engineering» of the Federal Medical-Biology Agency. Address: build. 1, 75, Volokolamskoye Route, Moscow, 125424; tel.: (495) 491-86-83

diasol@dol.ruYarkovS. P.ЯрковС. П.
Russian Federation

PhD, head of the department of spectral analysis methods of the Federal State Unitary Enterprise «State Scientific Research Institute of Biological Engineering» of the Federal Medical-Biology Agency. Address: build. 1, 75, Volokolamskoye Route, Moscow, 125424; tel.: (495) 491-86-83

diasol@dol.ruTitovA. A.ТитовА. А.
Russian Federation

junior research scientist of the department of spectral analysis methods of the Federal State Unitary Enterprise «State Scientific Research Institute of Biological Engineering» of the Federal Medical-Biology Agency. Address: build. 1, 75, Volokolamskoye Route, Moscow, 125424; tel.: (495) 491-86-83

diasol@dol.ruKhramovE. N.ХрамовЕ. Н.
Russian Federation

PhD, director of the Federal State Unitary Enterprise «State Scientific Research Institute of Biological Engineering» of the Federal Medical-Biology Agency. Address: build. 1, 75, Volokolamskoye Route, Moscow, 125424; tel.: (495) 491-73-72

niibp@dol.ruState Scientific-Research Institute of Biological Engineering, FMBA, Moscow, Russian FederationГосударственный научно-исследовательский институт биологического приборостроения ФМБА, Москва, Российская Федерация10092013689Vestnik Rossiiskoi akademii medetsinskikh nauk / Annals of the Russian academy of medical sciencesВестник Российской академии медицинских наук525707082015Copyright ©; 1970, "Paediatrician" Publishers LLCCopyright ©; 1970, Издательство "Педиатръ"1970"Paediatrician" Publishers LLCИздательство "Педиатръ"https://vestnikramn.spr-journal.ru/jour/about/submissionshttps://vestnikramn.spr-journal.ru/jour/article/view/150

The purpose of work was creation of quantative immunochromatographic tests (ICT) for measuring concentrations of the marker substance associated with somatic diseases: immunoglobulin Е (IgE), C-reactive protein (CRP) and fibrin D-dimer in blood serum (plasma), which is carried out with the help of videodigital analyzers of domestic development "Reflecom" and "Zondaj". ICT were designed in "sandwich» format, using colloid gold and monoclonal antibodies. It is shown, that calibration curves received with the help of ICT and devices of videodigital registration, are well approximated by exponential dependence Y=Aexp(-x/B)+y0, where Y- device readings , х- analytes concentration, А, В, у0– constants. Samples of blood serum (plasma), under investigation received in conditions of a hospital from patients. Correlation with electrochemiluminescent immunoassay, enzyme linked immunoassay, latex-agglutinations assay and immunochromatographic method was observed. Sensitivity of the developed tests was- 7,5 IU/ML for IgE, 5,7 ng/ml for CRP, 500 ng/ml for fibrin D-dimer. The developed analytical complex- videodigital analyzer "Zondaj" and ICT for quantitative measure of concentration IgE, fibrin D-dimer and CRP- can be successfully applied in laboratory practice and clinical laboratory researches alongside with actual immunochemistry methods.

Целью работы являлось создание иммунохроматографических тестов (ИХТ) для определения в сыворотке (плазме) крови маркеров соматических заболеваний: иммуноглобулина Е (IgE), С-реактивного белка (СРБ) и D-димера фибрина, а также изучение возможности их количественного иммунохроматографического анализа, осуществляемого с помощью видеоцифровых анализаторов отечественной разработки «Рефлеком» и «Зондаж». ИХТ были сконструированы в «сэндвич» формате, с применением конъюгатов наночастиц коллоидного золота (средний размер 30±5 нм) и моноклональных антител. Показано, что калибровочные кривые, полученные при помощи ИХТ и приборов видеоцифровой регистрации, хорошо аппроксимируются экспоненциальной зависимостью Y=Aexp(–x/B)+y0, , где Y-показания прибора, х-концентрация аналита, А, В, у0–константы. Исследовали образцы сыворотки (плазмы) крови, полученные в условиях стационара от больных. Показано, что концентрации аналитов в клинических образцах сыворотки (плазмы) крови, определенные с помощью электрохемилюминесцентного метода, иммуноферментного анализа, с помощью технологии «MicroSlide», латекс-агглютинации линейно кореллируют с концентрациями аналитов определенными иммунохроматографически. Чувствительность разработанных тестов составила- 7,5 МЕ/мл для IgE, 5,7 нг/мл для С-реактивного белка, 500 нг/мл для D-димера фибрина. Разработанный аналитический комплекс — видеоцифровой анализатор «Зондаж» и ИХТ для количественного определения концентраций IgE, D-димера фибрина и СРБ — может осуществлять клинические лабораторные исследования наряду с применяемыми в настоящее время иммунохимическими методами, используемыми в практике лабораторного дела.

immunochromatographyimmunoglobulin ЕC-reactive proteinfibrin D-dimerиммунохроматографияиммуноглобулин ЕС-реактивный белокD-димер фибрина1. Lateral flow immunoassay. R.C. Wong, H.Y. Tse. (eds.). N.Y., Humana Press, Science &Business Media, 2009. 223 p.2. Starovoitova T.A., Zaiko V.V., Steriopolo N.A., Kalacheva O.S., Martynkina L.P., Kutvitskii V.A. et al. Video digital analysis laboratory diagnostics: complex "Expert-Lab" on the basis of the scanner to document, objectification and recording latex agglutination, gemagglyutinatsionnyh tests and immunoassays isoserological research. Laboratoriya = Laboratory. 2006; 1: 19–22.3. Zayko V.V., Martynkina L.P., Steriopolo N.A., Kalacheva O.S., Kutvitskiy V.A., Tugoloukov A.E. et al. Analytical characteristics microarray semiquantitative method for the production of latex tests with video digital recording. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika = Clinical Diagnostic Laboratory. 2008; 6: 17–20.4. Golubev S.S., Dzantiev B.B. Zherdev A.V., Kiseleva Yu.V., Korolenko Ya.A., Kudeyarov Yu.A., Malyuchenko V.M., Smirnova N.I., Sotnikov D.V. he method of calibration curves for immunochromatographic rapid test. Part 1. Immunochromatographic rapid test with colloidal gold. Metrologiya = Metrology. 2012; 10: 14–29.5. Berlina A.N., Vengerov Yu.Yu., Golubev S.S., Dzantiev B.B. Zherdev A.V., Kiseleva Yu.V., Korolenko Ya.A., Kudeyarov Yu.A., Malyuchenko V.M., Taranova N.A. The method of calibration curves for immunochromatographic rapid test. Part 2. Immunochromatographic rapid tests with quantum dots. Metrologiya = Metrology. 2012; 10: 31–41.20–22.6. Frens G. Controlled nucleation for the regulation of the partical size in monodisperse gold solution. Nature Phys. Sci. 1973; 241: 20–22.7. Byzova N.A., Safenkova I.V., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Comparative characteristics of colloidal gold nanoparticles of different sizes as carriers and markers in immunoassay analysis. Estestvennyye i tekhnicheskiye nauki = Technical and Natural Sciences. 2012; 1: 62–71.8. Titov A.A., Shilenko I.V., Morozov A.A., Yarkov S.P., Zlobin V.N. Development and optimization of immunoassay for the detection of botulinum toxins. Prikladnaya biokhimiya i mikrobiologiya = Applied Biochemistry and Microbiology. 2012; 48(2): 249–256.9. Taranova N.A., Berlina A.N., Zherdev A.V., Dzantiev B.B. Quantitative immunoassay determination of total IgE in human serum using different methods of approximation of calibration dependence. Sovremennyye problemy nauki i obrazovaniya = Problems of Modern Science and Education. 2012; 5. Available at: www/ science-education.ru/105–7168.10. Тiets N.U. Entsiklopediya klinicheskikh laboratornykh testov. [Encyclopedia of Clinical Laboratory Tests. Transl. from English. Edited by Men’shikova V.V.]. Мoscow, Labinform, 1997. 942 p.11. Patterson R., Grammer L., Greenberger P.А. Allergicheskiye bolezni: diagnostika i lecheniye. [Allergic Diseases Diagnosis and Treatment. Transl. from English. Edited by Chuchalina А.G., Gushchina I.S.]. Мoscow, GEOTAR-Меdiа, 2000. 768 p.